無(wú)血清凍存液是一種專(zhuān)門(mén)用于細(xì)胞低溫冷凍保存的溶液,在保護(hù)細(xì)胞活性與功能方面具有重要作用。以下是關(guān)于它的詳細(xì)介紹:
1.滲透性保護(hù)劑
常見(jiàn)成分:如二甲基亞砜(DMSO)、甘油等。
作用機(jī)制:這些物質(zhì)能夠降低細(xì)胞內(nèi)冰晶形成的溫度,減少細(xì)胞在冷凍過(guò)程中因冰晶形成而導(dǎo)致的機(jī)械損傷。它們可以與水分子結(jié)合,替代部分水分子參與冰晶形成過(guò)程,從而使冰晶的形成更加均勻、細(xì)小,減輕對(duì)細(xì)胞結(jié)構(gòu)的破壞。
2.防凍蛋白
常見(jiàn)成分:如胎牛血清白蛋白(BSA)等。
作用機(jī)制:這類(lèi)蛋白可以抑制冰晶的生長(zhǎng)和重結(jié)晶,進(jìn)一步保護(hù)細(xì)胞免受冰晶形成的損害。同時(shí),它們還能穩(wěn)定細(xì)胞膜,防止細(xì)胞在冷凍過(guò)程中發(fā)生破裂。
3.緩沖體系
常見(jiàn)成分:如磷酸鹽緩沖液(PBS)等。
作用機(jī)制:緩沖體系的主要作用是維持凍存液的pH值穩(wěn)定。在細(xì)胞冷凍和解凍過(guò)程中,pH值的波動(dòng)可能會(huì)對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生不利影響,甚至導(dǎo)致細(xì)胞死亡。緩沖劑能夠中和細(xì)胞代謝過(guò)程中產(chǎn)生的酸性或堿性物質(zhì),保持凍存液的pH值在一個(gè)相對(duì)穩(wěn)定的范圍內(nèi),從而為細(xì)胞提供一個(gè)適宜的酸堿環(huán)境。
二、保護(hù)細(xì)胞活性與功能的具體體現(xiàn)
1.細(xì)胞復(fù)蘇存活率高
使用無(wú)血清凍存液冷凍保存的細(xì)胞,在復(fù)蘇后具有較高的存活率。這是因?yàn)樵搩龃嬉耗軌蛴行ПWo(hù)細(xì)胞在冷凍過(guò)程中的結(jié)構(gòu)和功能完整性,減少細(xì)胞死亡。實(shí)驗(yàn)表明,與傳統(tǒng)的含血清凍存液相比,凍存液可以使某些細(xì)胞類(lèi)型的復(fù)蘇存活率提高10%-20%。
2.細(xì)胞功能不受影響
細(xì)胞在經(jīng)過(guò)凍存液的冷凍和解凍過(guò)程后,其正常的生理功能能夠得到有效保留。例如,干細(xì)胞在復(fù)蘇后仍然保持著多向分化的潛能;免疫細(xì)胞仍能正常發(fā)揮免疫監(jiān)視、殺傷等功能。這使得研究人員在進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)和應(yīng)用時(shí),能夠得到具有正常功能的細(xì)胞。
3.減少細(xì)胞污染風(fēng)險(xiǎn)
由于凍存液中不含有血清等動(dòng)物源成分,因此可以有效避免因血清帶來(lái)的病原體污染風(fēng)險(xiǎn),如病毒、支原體等。這對(duì)于需要嚴(yán)格無(wú)菌條件的細(xì)胞培養(yǎng)和研究工作來(lái)說(shuō)尤為重要。
