糖發(fā)酵試驗

實驗原理

　　糖發(fā)酵試驗是zui常用的生化反應(yīng)，在腸道細(xì)菌的鑒定上尤為重要。絕大多數(shù)細(xì)菌都能利用糖類作為碳源和能源，但是它們在分解糖的能力上有很大的差異，有些細(xì)菌能分解某種糖并產(chǎn)酸（如乳酸、醋酸、丙酸等）和氣體（如氫、甲烷、二氧化碳等）；有些細(xì)菌只產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。例如大腸桿菌能分解乳糖和葡萄糖產(chǎn)酸并產(chǎn)氣；傷寒桿菌能分解葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，不能分解乳糖；普通變形桿菌分解葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣，不能分解乳糖。

　　酸的產(chǎn)生可利用指示劑來斷定。在配制培養(yǎng)基時預(yù)先加入溴甲酚紫[pH5．2（黃色）-6．8（紫色）]，當(dāng)發(fā)酵產(chǎn)酸時，可使培養(yǎng)基由紫色變?yōu)辄S色。氣體的產(chǎn)生可由發(fā)酵管中倒置的德漢氏小管中有無氣泡來證明.

實驗試劑

盛有葡萄糖發(fā)酵培養(yǎng)基的試管和乳糖發(fā)酵培養(yǎng)基的試管各3支（內(nèi)裝有倒置的德漢氏小管）

實驗設(shè)備

試管架，接種環(huán)

實驗材料

大腸桿菌，普通變形桿菌（ Proteus vulgaris）斜面各1支

實驗步驟

1、編號

　　用記號筆在各試管上分別標(biāo)明發(fā)酵培養(yǎng)基名稱和所接種的菌名。

2、接種

　　取盛有葡萄糖發(fā)酵培養(yǎng)基的試管3支，按編號1支接種大腸桿菌，另1支接種普通變形桿菌，第3支不接種，作為對照。另取乳糖發(fā)酵培養(yǎng)基試管3支，同樣1支接種大腸桿菌，1支接種普通變形桿菌，第3支不接種，作為對照。

　　
3．將上述已接種的葡萄糖和乳糖發(fā)酵試管和對照管置37℃溫室中培養(yǎng)24小時。

4．觀察結(jié)果。

　　結(jié)果

　　將實驗結(jié)果填入下表。“”表示產(chǎn)酸產(chǎn)氣；“ ”表示產(chǎn)酸不產(chǎn)氣；“-”表示不產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。