Masson 三色染色試劑盒染色原理方法

結(jié)締組織狹義上是指其含有的三種纖維：膠原纖維、網(wǎng)狀纖維、彈力纖維、而膠原纖維（collagen fiber）是分布zui廣、含量zui多的一種纖維。
Masson三色染色是結(jié)締組織染色中zui經(jīng)典的一種方法，是顯示組織中纖維的主要方法之一，是膠原纖維染色而經(jīng)典的技術(shù)方法。該法染色原理與陰離子染料分子的大小和組織的滲透有關(guān)，分子的大小由分子量來體現(xiàn)，小分子量易穿透結(jié)構(gòu)致密、滲透性低的組織；而大分子量則只能進入結(jié)構(gòu)疏松的、滲透性高的組織。然而，淡綠或苯胺藍的分子量都很大，因此Masson染色后肌纖維呈紅色，膠原纖維呈綠色或藍色，主要用于區(qū)分膠原纖維和肌纖維。 
Masson 三色染色試劑盒主要成份： 
1.weigert鐵蘇木素A液 
2.weigert鐵蘇木素B液 
3.麗春紅酸性品紅染液 
4.磷鉬酸溶液 
5.苯胺藍溶液
樣本要求： 組織片充分固定和脫蠟。 
Masson 三色染色試劑盒染色方法： 
1.組織固定于bouin氏液或zenker氏液，流水沖洗過夜，常規(guī)脫水包埋 
2.切片脫蠟至水 
3.weigert鐵蘇木素（weigert鐵蘇木素A、B液等比例混和）染5-10分，流水稍洗
4. 1%鹽酸酒精分化，流水沖洗數(shù)分 
5. 麗春紅酸性品紅染液染5-10分，流水稍沖洗。 
6.磷鉬酸溶液處理約5分鐘，不用水洗，直接用苯胺藍人染液復(fù)染5分鐘 
7. 1%冰醋酸處理1分鐘，95%酒精脫水多次。.*脫水、二甲苯透明，中性樹膠封固。
Masson 三色染色檢驗結(jié)果：
膠原纖維、粘液、軟骨呈藍色，肌纖維、纖維素和紅細胞染紅色、胞核染藍黑色。、
注意事項： 
1.weigert鐵蘇木素分A、B兩液，應(yīng)與臨用前將兩液等分混合，而不宜預(yù)先混合，否則容易氧化沉淀而逐漸失去染色能力。 
2.組織用bouin氏液或zenker氏液固定為佳，如已用10%甲醛液固定，切片可在脫蠟至水后，再放入bouin氏液作用一晚或置37℃溫箱內(nèi)1-2小時，然后流水沖洗切片至黃色消失再進行染色。 
3.磷鉬酸處理時，要鏡下控制，見肌纖維呈紅色，膠原纖維呈淡紅色即可。
Masson 三色染色試劑盒，貨號為G1340，常賣規(guī)格為7*50ml和7*100ml兩種。主要用于膠原纖維和肌纖維的鑒別染色。 由mallory三色染色改造，利用兩種或三種陰離子染料混合一起或先后作用完成染色，與陰離子染料分子大小和組織的滲透性有關(guān)。根據(jù)組織不同的滲透性能，選擇分子大小不同的陰離子的染料進行染色，便可把不同組織成份顯示出來。