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染料法熒光定量PCR試劑盒所用實時熒光定量技術解析

更新時間:2021-07-19 點擊量:4468
   染料法熒光定量PCR試劑盒通過對PCR擴增反應中的每一個循環(huán)產物熒光信號的實時監(jiān)測從而實現(xiàn)對起始模板的定性及定量分析。目前它主要通過兩種方式一熒光染料或者熒光標記的探針對PCR產物進行標記跟蹤,實時在線監(jiān)控反應過程,并結合相應的軟件對產物進行分析,計算待測樣品模板的初始濃度。
  染料法熒光定量PCR試劑盒采用的實時熒光定量技術是生命科學領域的一項重要技術,是快速檢測基因表達水平的快捷方法,是一種在DNA擴增反應中,以熒光化學物質測每次聚合酶鏈式反應循環(huán)后產物總量的方法,通過內參或者外參法對待樣品中的特定DNA序列進行定量的分析。高靈敏度、高重復性、高分辨率、動力學范圍廣,儀器穩(wěn)定性有保障,數據能夠比較真實的反映出樣品中RNA的相對含量變化。
  染料法熒光定量PCR試劑盒產品特點:
  1. 即開即用,用戶只需要提供樣品DNA 模板,操作簡單,定量準確快速。
  2. 根據TB 基因的保守序列設計引物,引物經過優(yōu)化,特異性高。
  3. 采用了改良后的Taq Polymerase,具有高擴增效率,高擴增靈敏度,高擴增特異性的特點。
  4. 本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
  熒光染料法:在PCR反應體系中,加入過量熒光染料,該染料只與雙鏈DNA小溝結合,并不與單鏈DNA鏈結合,而且在游離狀態(tài)不發(fā)出熒光,只有摻入DNA雙鏈中才可以發(fā)光,因此,在PCR體系中,隨著特異性PCR產物的指數擴增,每個循環(huán)的延伸階段,染料摻入雙鏈DNA中,其熒光信號強度與PCR產物的數量呈正相關。